Антитіла до грипу аналіз
У розпал епідемічного сезону дуже актуальне питання діагностики грипу. Це важливо і необхідно для своєчасного лікування захворювання, адже хвороба може призвести до різних серйозних ускладнень. Тому потрібне проведення лабораторних досліджень, включаючи аналіз на грип під час сезонної спалаху захворювання.
Загальний аналіз крові
Для того щоб поставити остаточний діагноз, зазвичай роблять аналіз крові на грип. Терапевт пропонує його у разі припущення цієї інфекції. Клінічні симптоми дають можливість лише запідозрити грип, але тільки лабораторний аналіз дасть остаточну відповідь. Сьогодні медицина пропонує декілька видів аналізів, які можуть визначити природу хвороби з високою точністю.
Терапевт може отримати багато інформації з загального аналізу, але визначити наявність вірусу грипу не вийде. Однак, відомо, що при такому захворюванні з’являються певні зміни загальної картини крові. В перші 24 години після зараження буде підвищений рівень лейкоцитів. На наступний день проявиться різке зниження лейкоцитів.
Змінюється також і лейкоцитарна формула. На тлі того, що лімфоцитів стає більше, кількість нейтрофілів зменшується. Незважаючи на те, що показник гемоглобіну і еритроцитів буде в межах норми, ШОЕ значно підвищиться.
Додаткові аналізи
Поява грипозних або інших вірусних захворювань під час епідемії змушує терапевта провести діагностику. Тому додатково до загального аналізу крові рекомендується провести ще кілька маніпуляцій:
- Біохімічний аналіз крові. При грипі особливих змін спостерігатися в результаті не буде. Підвищення кількості С-реактивного білка вкаже на наявність запального процесу в організмі. Але такий аналіз крові при грипі сам вірус не виявить.
- Специфічний аналіз на вірус грипу. Для його проведення необхідно взяти кров з вени. Таке дослідження підтвердить наявність вірусу. Завдяки серологічному методом можна визначити антигени вірусу. Наростання титру антитіл в 4 рази і більше є підтвердженням зараження грипом. Недоліком цього аналізу є потреба значної кількості часу для отримання результату.
- Імуноферментний аналіз. За допомогою цього експрес-методу можна швидко виявити вірус грипу. Для цього беруть мазки слизу і клітини з носоглотки. Потім отриманий матеріал обробляють особливим реактивом з мітками. Наявність світіння при просвічуванні ультрафіолетовим світлом говорить про присутність вірусу в мазках.
- Метод ПЛР. Він дає можливість швидко отримати підтвердження наявності вірусу. Для аналізу беруть мазки з носа і горла. Недоліком такого методу вважається неможливість визначити, чи живий вірус і відповідно є пацієнт ще заразним для оточуючих.
Такі аналізи зазвичай беруть у пацієнтів під час епідемії або при госпіталізації. Особливо важливо це зробити, якщо є загроза розвитку серйозних ускладнень.
ГРВІ та грип визнані найбільш поширеними захворюваннями верхніх дихальних шляхів інфекційного походження у дітей. Саме аналіз крові у дитини при грипі допомагає підтвердити наявність вірусу в організмі. Своєчасна діагностика дасть можливість уникнути ускладнень або навіть до летального результату у разі важкої форми хвороби.
Вірус грипу вважається одним з найбільш небезпечних вірусів. В холодну пору року його дуже легко підхопити. Враховуючи, що прогноз грипу може бути несприятливим, так як в 10% випадків він переходить в пневмонію, рекомендується своєчасно здавати аналізи.
Цікаве відео
Гострі респіраторні інфекції є найбільш поширеними захворюваннями в сучасному світі. Щорічно люди стикаються з епідеміями грипу, які вражають до 15% населення. А враховуючи високу мінливість вірусів, доводиться постійно удосконалювати методи лабораторної діагностики. Тому аналізи при грипі являють собою актуальне питання, яке потребує детального розгляду.
Загальні відомості
Грип – це високо заразне інфекційне захворювання вірусної природи. Він вражає переважно верхні відділи респіраторного тракту, але можуть залучатися також бронхи і легені. Збудником виступають віруси декількох серотипів A, B, C. Перший володіє найбільшою мінливістю, оскільки містить на своїй поверхні 3 види гемаглютиніну (н) і 2 варіанти нейрамінідази (N). Це ферменти, які відповідають за цитопатическое дію збудника. Насправді таких модифікацій набагато більше, просто решта переважно викликають хворобу у тварин. В даний час причиною інфекції стають два вірусу грипу A H1N1 (каліфорнійський) H3N2 (гонконгський).
Вірус передається людині повітряно-крапельним шляхом і поселяється на епітелії дихальних шляхів. Інкубаційний період грипу короткий – від кількох годин до кількох днів. Як правило, хвороба протікає в легкій формі, з моменту контакту з хворим до одужання проходить до 7 діб. Основними симптомами респіраторної інфекції стають:
- Висока лихоманка.
- Сухий кашель.
- Болі в горлі.
- Закладеність носа.
- Головні болі.
- Ломота в тілі, м’язах і суглобах.
- Одутлість і почервоніння обличчя.
- Ін’єкція судин склери.
Але у деяких пацієнтів хвороба протікає у важкій формі. В основному це стосується дітей, вагітних та осіб з супутньою патологією. У них імовірна сильна інтоксикація та ускладнення: пневмонії, гломерулонефрит, нейропатії, шок, набряк легенів і головного мозку. Тому вкрай важливе значення відводиться своєчасної лабораторної діагностики грипу.
Свідчення
Безумовно, аналіз на грип необхідний тим, у кого після клінічного обстеження лікар припускає зазначену інфекцію. Це можуть бути різні ГРВІ з синдромом інтоксикації. Схожі риси з грипом є у таких інфекцій:
- Аденовірусна.
- Респіраторно-синцитіальна.
- Риновірусна.
- Парагрип.
- Кір.
В диференційній діагностиці можуть потребувати також випадки мікоплазменної пневмонії, а також інших захворювань з продромальний період: черевний і висипний тиф, лептоспіроз, вірусні гепатити. Але основна сфера призначення аналізів – грипоподібні стани. Це дозволяє не тільки виявити збудника, але і встановити його серотипи.
Аналізи на вірус грипу показані пацієнтам, у яких є відповідні клінічні симптоми.
Проведення
Перед проведенням аналізу лікар детально оцінює клінічні дані і стан пацієнта. За результатами огляду видається направлення в лабораторію (наприклад, Інвітро). Існує кілька видів лабораторних досліджень, необхідних при підозрі на грип. До них відносяться:
- Загальний аналіз крові.
- Експрес-тести.
- Посів на культуру клітин.
- Серологічний аналіз.
- Молекулярно-генетичний метод.
Кожне дослідження має свої особливості, переваги і недоліки. Але рішення про те, які аналізи проводити, приймається лікарем. Він також скаже, як слід підготуватися до взяття біоматеріалу. Пацієнту лише слід виконувати рекомендації фахівця.
Загальний аналіз крові
Зміни в організмі, що відбуваються при інфікуванні вірусом, можна визначити за загальним (клінічним) аналізу крові. Він не дозволяє ідентифікувати збудника, але дає непрямі підказки про його впливі на організм і дозволяє встановити ступінь тяжкості хвороби. Дослідження проводиться натще. Береться кров з пальця шляхом проколювання стерильним скарифікатором та набирання в скляний капіляр. Далі підраховуються формені елементи (лейко-, еритро – і тромбоцити), вміст гемоглобіну, визначається ШОЕ та кольоровий показник.
Експрес-тести
Відносно новим і новим напрямком діагностики грипу вважаються експрес-тести. Вони засновані на иммунохроматографическом визначенні антигенів (вірусних частинок). На тест-смужку нанесені стандартні антитіла до вірусів грипу A і B, мічені спеціальним барвником. Він стає видно тільки при наявності в зразку антигенів збудника, тобто утворення специфічних імунних комплексів.
Спочатку необхідно взяти біоматеріал – мазок слизу з носа. Пацієнта просять закинути голову назад. Стерильний тупфер вводять в ніздрю і, обертаючи його там, торкаються стінок ходів. Це не дуже приємно, з-за лоскотання в носі можуть сльозитися очі. Тому у дітей частіше використовують назальні змиви – фізіологічний розчин вводять в ніздрю зі шприца і відсмоктують слиз. Потім матеріал поміщають у спеціальний флакон з рідиною-реагентом, збовтуючи його для гарного перемішування. Кілька крапель наносять на тест-смужку в спеціальне віконце. Так робиться і експрес-аналіз на свинячий грип (каліфорнійський).
Посів на культуру клітин
Матеріал, отриманий від пацієнта (мазки або змиви), для ідентифікації вірусу засівається на клітинну культуру: шар фібробластів курячого ембріона (найчастіше), нирок мавп, собак або великої рогатої худоби. Зразки інкубують в термостатах при температурі людського тіла. Вірус викликає цитопатическое дію, що проявляється у руйнуванні клітинного шару. Якщо така реакція виникла, то матеріал переносять на іншу середовище для визначення гемагглютинирующих властивостей. Для подальшого вивчення антигенної структури та типування вірусу виконують реакцію з грипозними діагностикумами.
Середовищем для культивування вірусів грипу виступає клітинна культура. При посіві можна виявити ознаки пошкоджуючої дії збудника, а подальший аналіз дає змогу його ідентифікувати.
Серологічні аналізи
Найбільш поширене серологічне дослідження при грипі. Воно засноване на визначенні антитіл до вірусу в організмі пацієнта. Це можна зробити в будь-якій сучасній лабораторії Інвітро, Сінево тощо). Для аналізу слід здавати венозну кров за загальноприйнятими правилами з 5-7 дня хвороби. Потім її центрифугують, відокремлюючи формені елементи від сироватки. Останню використовують у різних реакціях:
- Гальмування гемаглютинації (РГГА).
- Зв’язування комплементу (РСК).
- Нейтралізації (РН).
- Імуноферментного аналізу (ІФА).
Найчастіше доводиться аналізувати кров, взяту дворазово з інтервалом 7-10 діб. Це дозволяє оцінити титр антитіл в динаміці. Кожен з методів має певну методику виконання, але принцип один і той же: імуноглобуліни сироватки зв’язуються зі стандартними антигенами, утворюючи комплекс. Останній ідентифікується за допомогою інших реагентів (барвників, ферментів). Але враховуючи утворення антитіл в організмі лише з другого тижня хвороби, серологічний аналіз крові при грипі має в основному ретроспективне значення.
Молекулярно-генетичний метод
За допомогою методу полімеразної ланцюгової реакції можна не тільки виявити вірус грипу, але і зробити його типування, тобто ідентифікацію. Для цього спочатку беруть мазок (змиви) з носа. Потім матеріал змішують із спеціальним реагентом, що містить праймер і ферменти, поміщаючи його в апарат для ампліфікації. У ньому відбувається багаторазове копіювання вірусної РНК і фотохроматографическая детекція. Молекулярно-генетичне дослідження дозволяє виявити дуже малі кількості збудника і провести диференціальну діагностику. А завдяки вдосконаленій методиці – ПЛР в реальному часі – вдається мінімізувати терміни виконання аналізу.
Результати
Терміни проведення досліджень різні – від 10 хвилин (експрес-тест) до 48 годин (культуральний метод, ПЛР). Іноді при грипі аналізи вимагають подальшого підтвердження більш специфічними і чутливими методиками, що призводить до уповільнення діагностики. А отримані результати повинні інтерпретуватися лише фахівцем.
Загальний аналіз крові
У першу добу хвороби в крові відзначається лейкоцитоз із зсувом формули вліво. Збільшується число паличкоядерних нейтрофілів і юних. Далі рівень лейкоцитів при грипі помітно знижується, що зберігається протягом усього періоду, аж до одужання. Відзначається відносний лімфоцитоз, ШОЕ залишається в межах нормальних значень. Будь-яка лабораторія може зробити такий аналіз, а не лише Інвітро.
Експрес-тест
Найбільш швидкий аналіз може дати лише якісний результат у відношенні вірусів A або B. Після нанесення матеріалу на тест-системі з’являється дві смуги: одна контрольна, а інша говорить про виявлення збудника. Колір барвника може відрізнятися, в залежності від виробника. Якщо ж виявлено лише контрольна лінія, то тест вважається негативним. При позитивному результаті необхідно обов’язкове дообстеження, тому пацієнту доведеться ще здати аналіз на свинячий (або інший) грип.
Результат експрес-тесту оцінюється вже через 10 хвилин після нанесення в нього матеріалу. Як його інтерпретувати, зазначено в інструкції по застосуванню.
Посів на культуру клітин
Коли після зараження культури клітин в ній виявляються ознаки цитопатичної дії, це свідчить про наявність вірусу в досліджуваному матеріалі. Збудник грипу викликає руйнування біологічного шару. А при пересевании на іншу середу спостерігається гемагглютинация – злипання еритроцитів під впливом ферментів вірусу.
Серологічні аналізи
Серологическая діагностика проводиться так званим методом парних сироваток. Антитіла до вірусу, незалежно від технології їх ідентифікації, повинні не просто бути присутнім у хворого на грип, але і наростати в динаміці. Діагностичним титром вважається збільшення рівня імуноглобулінів у 4 і більше разів з інтервалом в 7-10 днів.
Молекулярно-генетичний метод
Результат полімеразної ланцюгової реакції може бути представлений у якісному, полуколичественном або кількісному вигляді. Останній варіант найбільш переважний, оскільки вказує на ступінь вірусного навантаження і цілком годиться для оцінки тяжкості стану пацієнта. Але і просте зазначення на виявлення в зразку біоматеріалу РНК збудника безсумнівно підтверджує діагноз. Це найбільш точний і чутливий метод діагностики грипу.
Вибір лабораторії
Кожен пацієнт хоче, щоб результати його досліджень були достовірними. Тому питання про те, де здати аналіз, є дуже актуальним. Слід зазначити, що якість діагностики залежить від багатьох моментів: підготовки персоналу, наявності обладнання і матеріалів, дотримання правил взяття біоматеріалу, його транспортування і зберігання. У великих лабораторіях з розвиненою мережею (наприклад, таких, як Інвітро) дотримані і контролюються всі ключові аспекти. У виборі місця, де можна здати мазок з носа кров, однозначно допоможе лікар з урахуванням власного досвіду.
Важливу роль при грипі відіграють лабораторні методи дослідження. Для постановки діагнозу необхідно виявити сам вірус і визначити його вид, в чому допоможуть різні аналізи. Одні з них ідентифікують збудника, а інші вказують на непрямі ознаки його присутності. Але що саме здавати в конкретному випадку, підкаже лише лікар.
Аналізи на виявлення грипу
Автор
Парецкая Олена Михайлівна
Аналіз на грип, проведений при підозрах саме на цю інфекцію, дозволяє поставити остаточний діагноз. Клінічні симптоми дають можливість лише запідозрити грип, але остаточну відповідь – за лабораторією. На сьогоднішній день розроблено безліч аналізів, які підтверджують природу хвороби як опосередковано, так і безпосередньо, причому з високою точністю.
Загальний аналіз крові
Аналіз крові з пальця може дати лікареві багато інформації про природу захворювання, але не покаже наявності саме вірусу грипу. Однак, відомо, що при грипі спостерігаються типові зміни загальної картини крові. У першу добу хвороби аналіз показує підвищений рівень лейкоцитів (лейкоцитоз) з підвищенням рівня паличкоядерних форм, іноді можуть проявитися і незрілі форми клітин — метамієлоцити (юні).
На другу добу відбувається різке зниження лейкоцитів – лейкопенія. Змінюється також і процентне співвідношення лейкоцитів (лейкоцитарна формула). Нейтрофілів в процентному відношенні стає менше, а лімфоцитів — більше. Рівень гемоглобіну і еритроцитів залишається в межах норми, але різко збільшується показник ШОЕ (швидкість осідання еритроцитів).
Біохімічний аналіз крові
При грипі немає особливих, типових змін у цьому аналізі. Іноді може змінюватися співвідношення білкових фракцій, а також підвищується кількість С-реактивного білка, який говорить про наявність запалення в організмі. Самого вірусу грипу цей аналіз також не виявляє.
Специфічні аналізи
Можна провести специфічні дослідження, які підтвердять наявність вірусу. Для цього береться кров на грип з відня. Серологічними методами пределяются антитіла до вірусу, або антигенів вірусу. Підтвердженням зараження вірусом грипу є наростання титру антитіл в 4 рази і більше. Для проведення даного аналізу потрібно значний час, тому даний метод більше підходить для ретроспективної діагностики (у період видужання).
А якщо потрібно отримати підтвердження наявності вірусу швидко, тоді які аналізи здають на грип? Сучасним, швидким і точним є метод ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції), який виявляє РНК вірусу. Для проведення аналізу береться мазок з носа і глотки або проба відокремлюваного носоглотки. Метод високо специфічний, не дає помилок, проводиться швидко.
Експрес-методом визначення вірусу грипу є імуноферментний аналіз. Він виявляє наявність вірусу в області верхніх дихальних шляхів. Отримані за допомогою мазка слиз і клітини з носоглотки обробляють особливим реактивом з мітками. Якщо вірус грипу в мазках присутній, утворюються особливі комплекси з мітками, які в ультрафіолетовому світлі дають особливе світіння.
Коли і де?
Далеко не завжди у пацієнтів при підозрі на грип проводиться забір аналізів, особливо специфічних. Зазвичай для підтвердження грипу проводять забір мазків у перших хворих до початку епідемії. Далі діагноз «грип» виставляється за клінічними даними.
Можуть бути призначені аналізи на виявлення грипу при госпіталізації, при загрозі або розвитку ускладнень, для підтвердження саме грипу, як причини ускладнень (або летального результату). За призначенням лікаря ці аналізи виконуються в лабораторії поліклініки, безкоштовно.
Послуги по визначенню грипу за допомогою аналізів пропонують приватні клініки, але ці дослідження коштують досить дорого — зате забір матеріалу може проводитися з виїздом на будинок, що дуже зручно.
Інфекційні хвороби. Національне керівництво. / Під ред. Н.Д. Ющука, Ю. Я. Венгерова. — 2015
ЕФЕКТИВНІСТЬ ФАРМАКОТЕРАПІЇ ГРИПУ ТА ІНШИХ ГРВІ У ПЕРІОД ПАНДЕМІЇ ГРИПУ 2009-2010 РР / Малєєв Ст. Ст., Краснікова Т. В., Кондратьєва Т. В. // Інфекційні хвороби.. — 2010. — Т. 8. № 4.
ПОРІВНЯННЯ ЕПІДЕМІЙ ГРИПУ В РОСІЇ 2009 І 2011 РОКІВ, ВИКЛИКАНИХ ПАНДЕМІЧНИМ ВІРУСОМ ГРИПУ А(H1N1) / Карпова Л. С., Бурцева Е. І., Поповцева Н.М., Столярова Т. П. // Епідеміологія і вакцинопрофілактика.. — 2011. — № 5 (60)
Розробка діагностичної тест-системи на основі «Сандвіч»-іфа для виявлення вірусу грипу А птахів / Жемаева Ст. Л., Козлов А. Ю., Ямникова С. С., Кальнов С. Л., Верховський О. А., Алипер Т. В. // Питання вірусології. — 2009. — Т. 54 №4. — 45 с.
Оцінка ефективності диференціальної діагностики грипу методом мультиплексного ПЛР з детекцією у режимі реального часу / Лободанов С. А., Ніконова А. А., Файзулоев Е. Б., Трушакова С. В., Забіяка Ю. І., Калінкіна М. А., Іванова В. Т., Шевченко Е. С., Звєрєв Ст. Ст., Бурцева Е. І. // Питання вірусології. — 2012. — Т. 57 №1. — с. 42-45
Порівняльний аналіз ефективності швидких тестів в діагностиці грипу А та респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції у дітей / Петрова Е. Р., Суховецкая В. Ф., Писарєва М. М., Майорова В. Р., Сверлова М. В., Даниленко Д. М., Петрова П. А., Кривицька В. З., Соминина А. А. // Клінічна лабораторна діагностика. — 2015. — Т. 60 №11. — с. 44-49